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发光细菌是一类在正常的生理条件下能够发射可见荧光的细菌,这种可见荧光波长在450-490nm之间,在黑暗处肉眼可见。全世界已命名的发光细菌有以下几种:① 透明度在线分析仪属于异短杆菌属(Xenorhabdus)的有发光异短杆菌(Xenorhabdus luminescens);② 透明度在线分析仪属于发光杆菌属(Photobacterium)的有明亮发光杆菌(Photosbacterium phosphoreum)和鳆发光杆菌(P.1eiognathi);③水质透明度在线分析仪 属于希瓦氏菌属(Shewanella)的有羽田希瓦氏菌(Shezoanella hanedai),以前也曾经把它归类为交替单胞菌属(Alteromonas)的海氏交替单胞菌(Alteromonas hanedia);④ 属于弧菌属(Vibrio)的有哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)、美丽弧菌生物型I(V.splendidus biotype I)、费氏弧菌(V.fischeri)、火神弧菌(V.1ogei)和东方弧菌(V.orientalis)。霍乱弧菌(V.cholerae)和地中海弧菌(V.mediterranei)中的某些菌株有发光现象,曾有报道易北河弧菌(V.albensis)有发光现象,后将其重新分类归人霍乱弧菌(V.cholerae)。另外,中国学者分离到一株淡水发光细菌命名为青海弧菌(V. qinhaiensis),还没收入伯杰氏细菌手册。在以上发光细菌中,异短杆菌和青海弧菌属于淡水发光细菌,其它都是海洋细菌。发光细菌主要分布于海洋环境中。
在线pH分析仪主要采用离子选择电极测量来实现准确的检测。舟山透明度在线分析仪仪器上的电极:pH和参比电极。PH电极具有离子选择膜,与被测样品中相应的离子发生反应。膜是一种离子交换器,水质透明度在线分析仪它与离子电荷反应并改变膜电位。然后可以检测液体、样品和膜的电位。在薄膜的两边检测到的两个电位差产生电流。样品、参比电极和参比电极液形成一边的“回路”,另一边是膜、内部电极液和内部电流。内部电极液与样品之间的离子浓度差会在工作电极膜的两侧产生一个电化学电压。电压将通过高导电的内部电极被引导到放大器,参考电极也将被引导到放大器。透明度在线分析仪通过检测一个具有准确已知离子浓度的标准溶液来检测样品中的离子浓度,得到一个校准曲线。 当被测离子在溶液中接触电极时,离子在离子选择电极基体含水层中发生迁移。迁移离子的电荷变化中存在一个电位,使膜表面之间的电位发生变化,在测量电极和参考电极之间产生一个电位差。离子选择性电极,电极包含一个已知浓度的液体电极、离子选择性电极基于离子渗透相应的样品,所以在膜两侧的膜电位、离子浓度在示例中,电压信号也不同,样本容量的大小可以被测量的电压信号离子的浓度。离子浓度的不同液体电极和样品之间的结果在一个电极膜的电化学势,可从电极和转移到放大器的输入端,其他放大器的输入端连接,接地参考电极,电极电压可以进一步放大。由此产生的电压差决定了被测样品的离子浓度。
舟山水质透明度在线分析仪发光机理的研究表明,不同种类的发光细菌的发光机理是相同的,是由特异性的荧光酶(LE)、还原性的黄素(FMNH2)、八碳以上长链脂肪醛(RCHO)、氧分子(O2)所参与的复杂反应,透明度在线分析仪大致历程如下:FM NH2+LE → FMNH2·LE+ O2 → LE·FM NH2·O2+ RCH O→LE·FMNH2·O2·RCH0 → LE+ FM+H2O+RCOOH+光。概括的说就是,细菌生物发光反应是由分子氧作用,胞内荧光酶催化,将还原态的黄素单核苷酸(FMNH2)及长链脂肪醛氧化为FMN 及长链脂肪酸氧化,同时释放出最大发光强度在波长为450-490nm处的蓝绿光。其中三步反应产生三种中间产物,寿命极短,很难分离出来。荧光素酶是生物体内催化荧光素或脂肪醛氧化发光的一类酶的总称,细菌荧光素酶是含α、β两个多肽亚基的单加氧酶,只有两个亚基共存时才有活性。从不同海洋细菌中提取到的细菌荧光素酶其分子量差别较小。王安平等分离纯化了东方弧菌的荧光酶并对其酶学性质进行了研究,分离得到了两个分子量分别为44 kD和41 kD的亚基,该酶反应的最佳温度在l8℃ ,超过25℃酶即迅速失活。
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